液相色譜儀測定腎康注射液中原兒茶醛含量

在所有色譜技術(shù)中，液相色譜法（liquid chromatography，LC）是zui早（1903年）發(fā)明的，但其初期發(fā)展比較慢，在液相色譜普及之前，紙色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法是色譜分析法的主流。到了20世紀(jì)60年代后期，將已經(jīng)發(fā)展得比較成熟的氣相色譜的理論與技術(shù)應(yīng)用到液相色譜上來，使液相色譜得到了迅速的發(fā)展。特別是填料制備技術(shù)、檢測技術(shù)和高壓輸液泵性能的不斷改進，使液相色譜分析實現(xiàn)了化和高速化。具有這些優(yōu)良性能的液相色譜儀于1969年商品化。從此，這種分離效率高、分析速度快的液相色譜就被稱為液相色譜法（high performance liquid chromatography，HPLC），也稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法。
　　氣相色譜只適合分析較易揮發(fā)、且化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定的有機化合物，而HPLC則適合于分析那些用氣相色譜難以分析的物質(zhì)，如揮發(fā)性差、極性強、具有生物活性、熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)。現(xiàn)在，HPLC的應(yīng)用范圍已經(jīng)遠遠超過氣相色譜，位居色譜法。

液相色譜的類型

　　廣義地講，固定相為平面狀的紙色譜法和薄層色譜法也是以液體為流動相，也應(yīng)歸于液相色譜法。不過通常所說的液相色譜法僅指所用固定相為柱型的柱液相色譜法。

　　通常將液相色譜法按分離機理分成吸附色譜法、分配色譜法、離子色譜法和凝膠色譜法四大類。其實，有些液相色譜方法并不能簡單地歸于這四類。按分離機理，有的相同或部分重疊。但這些方法或是在應(yīng)用對象上有*之處，或是在分離過程上有所不同，通常被賦予了比較固定的名稱。

表8-1 HPLC按分離機理的分類

類 型 主要分離機理 主要分析對象或應(yīng)用領(lǐng)域
吸附色譜 吸附能，氫鍵 異構(gòu)體分離、族分離，制備
分配色譜 疏水分配作用 各種有機化合物的分離、分析與制備
凝膠色譜 溶質(zhì)分子大小 高分子分離，分子量及其分布的測定
離子交換色譜 庫侖力 無機離子、有機離子分析
離子排斥色譜 Donnan膜平衡 有機酸、氨基酸、醇、醛分析
離子對色譜 疏水分配作用 離子性物質(zhì)分析
疏水作用色譜 疏水分配作用 蛋白質(zhì)分離與純化
手性色譜 立體效應(yīng) 手性異構(gòu)體分離，藥物純化
親和色譜 生化特異親和力 蛋白、酶、抗體分離，生物和醫(yī)藥分析

液相色譜儀流程圖