相色譜法測定蔬菜中3種有機磷農藥殘留量

摘要：采用液相色譜法對蔬菜中甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷進行同時分離和檢測，對樣品的提取、凈化以及檢測的色譜條件進行篩選和優化。以shim-pack VP-ODS為分離柱；流動相為V甲醇：V水=85：15，紫外檢測波長為250nm。該方法所測得的3種有機磷在0.02—2.0μL內具有良好的線性，檢出限達1.0—5.0μL，加標回收率在97.44％一101.22％。該方法適合各種蔬菜農藥殘留量的分析。
關鍵詞：農藥殘留；液相色譜法；蔬菜；有機磷
有機磷農藥是目前我國使用量較大的殺蟲劑之一，主要應用于糧食、蔬菜和水果上。雖然有機磷農藥屬非持久性農藥，但其大量使用必然會對環境產生負面影響，對人、蓄構成嚴重威脅．長期食用受污染的糧食、蔬菜，是導致癌癥、動脈硬化、心血管病、胎兒畸形、死胎、早天、早衰等疾病的重要原因；絕大多數人食用有害蔬菜后并不馬上表現出癥狀，但毒物在人體中富集，時間長了便會釀成嚴重后果。我國近年來發生的農藥中毒事故大多數集中于高毒有機磷農藥，以對硫磷zui多，部分地區占80％左右。因此，建立有效的檢測農副產品中有機磷農藥殘留量的方法具有重要意義。有機磷農藥的測定常采用氣相色譜法，可是，大部分有機磷農藥具有很強的極性和熱不穩定性，給氣相色譜分析帶來一定的難度。本研究采用液相色譜法同時測定蔬菜中甲基對硫磷、乙基對硫磷和甲拌磷。
1 實驗部分
1．1 儀器與試劑
儀器．LC-1OAT液相色譜儀(日本島津公司)，包括：SPD-10AVP／10APVP紫外-可見檢測器，LC-1OA高壓溶液輸送泵和N2000色譜工作站(浙江大學智能信息工程研究所)；BF2000氮氣吹干儀(北京八方世紀科技有限公司)；FS-1電動勻漿機(金壇市富華儀器有限公司)．試劑．甲基對硫磷標準品(99.0％，國家農藥質檢中心(沈陽))；乙基對硫磷標準品(99.0％，天津農藥質檢中心)；甲拌磷標準品(98.0％，天津農藥質檢中心)；甲醇(色譜純，北京化工廠)；乙腈(色譜純，天津市博迪化工有限公司)；實驗用水為重蒸餾水。
1．2 色譜條件
色譜柱為Shim-Pack：VP-ODS(150L×4．6)；流動相為V甲醇：V水=85：15；流速為1.0mL／min．進樣量20μL，以基線構成之面積稱峰面積。A＝×σ×h＝2.507σh＝1.064 Wh/2h>峰面積外標法定量。
1．3 標準溶液的配制
準確稱取一定量的農藥標準品，用甲醇制成一定濃度的儲備液，再逐級稀釋儲備液，得質量濃度分別為0.10、0.50、1.0、1.5、2.0mg／L的標準混合液。
1．4 樣品處理方法
取1000g的白菜，取可食部分，用干凈的紗布擦去樣品表面的附著物，采用對角線分割法，取對角部分，將其切碎．準確稱取3份25g試樣，分別加入50.0mL的乙腈，在勻漿機中勻漿2min后用濾紙過濾，濾液收集到裝有5g氯化鈉的100mL的具塞量筒中，蓋上塞子，劇烈震蕩1min，靜至10min，使乙腈與水相分層．將含乙腈的有機層經盛有3g的無水硫酸鈉的漏斗過濾于100mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度，從中吸取10mL溶液，再用氮氣吹干儀吹至近干后用甲醇溶解定容至5mL，經0.45μm濾膜過濾后進樣。
2 結果與討論
2．1 測定波長的選擇
分別將3種農藥的標準儲備液依次用UV一1100紫外／可見分光光度計進行波長掃描，測得3種農藥的zui大吸收波長分別為甲基對硫磷265nm，乙基對硫磷259nm，甲拌磷為238nm．綜合考慮3種組分的zui大吸收值及靈敏度，zui終選擇紫外檢測波長為250nm。
2．2 流動相組成對分離度的影響
實驗考察了甲醇-水的不同比例對甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷分離的影響。實驗結果表明，隨著甲醇含量的增加，其分離度逐漸減小，當甲醇：水=85：15時，各組分仍能夠得到很好的分離，且分析所用的時間較短。
2．3 工作曲線和檢出限
取“1．3”節的標準溶液，在優化的色譜條件下進行分析，得到標準色譜圖。同一樣品平行測定5次，取其平均值，繪制工作曲線，以峰面積A對濃度c(mg／L)回歸計算，結果表明線性關系良好，回歸方程、相關系數和檢測限。
2．4 精密度實驗
取質量濃度為1.5mg／L的混合標準品，在上述色譜條件下，連續進行7次測定，經計算得到測定甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的精密度RSD分別為4.6％、3.2％、2.9％。
2．5 回收率測定
在已知含量的白菜樣品中分別加入不同濃度的有機磷農藥標準品，按“1．4”節方法制備樣品液進行測定，扣除樣品中原有的農藥含量，求出加標回收率，結果可知，甲基對硫磷回收率為95.44％～98.33％；乙基對硫磷回收率為93.33％～101.67％；甲拌磷回收率為94.00％～97.78％。
2．6 樣品分析
在白菜中加入上述3種農藥作為模擬蔬菜樣品，按“1．4”節方法處理樣品后按上述色譜條件進行測定。得到樣品色譜圖如圖所示。甲基對硫磷、乙基對硫磷、甲拌磷的殘留量分別為1.75、2.13、1.83mg/kg。
參考文獻：
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